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    如何才能正確使用色譜柱?

      色譜柱是一種基于大孔徑Fused-Core技術的快速、高效型液相色譜柱。它緊密鍵合了二甲基丁基,封端,是一種非常穩定的反相柱,可用于分離蛋白等大分子物質。
     
      應用范圍: 
      1、pH值范圍寬:
     ?、賞H>8時,許多C18硅膠基質由于填料顆粒溶解,色譜柱內產生空隙,會過早地失去柱效。隨著鍵合相覆蓋率的增加,色譜柱壽命會延長。
     ?、趐H<2時,許多C18硅膠基質由于鍵合相的水解作用,會過早地失去柱效。使用三官能團鍵合相可獲得較佳穩定性。
      2、高溫穩定性。
     
      它的優勢:
      1、更低的疏水性,適于快速分離:
      色譜柱提供與C18和C8相似的選擇性,但保留更低。更短的鏈長和更低的疏水特性使C4成為保留和分離疏水性多肽和蛋白質的理想固定相。
      2、具有出眾的峰形,高柱效和較高的靈敏度:
      以同樣的高純硅膠作為基質,色譜柱能提供良好的峰形。色譜柱提供1.9μm的粒徑,以實現更快、更高效的分離。
     
      色譜柱的使用方法:
      1、新柱活化:新的色譜柱活化:采用100%甲醇1ml/min沖洗60min,再換成流動相進行平衡;如果流動相中含有緩沖鹽,在換成流動相前,請使用過渡流動相過渡后再換流動相平衡;
      2、色譜柱保存溶液與評價報告一致。
      3、在使用過程中如果流動相沒有磷酸緩沖鹽的存在,新柱子在使用之前需用100%的甲醇以0.5~1.0的流速平衡30min左右,進流動相,待系統基線平穩直接進樣即可。做完實驗再用100%的純甲醇以0.5~1.0的流速沖洗30min左右,最后用100%的純甲醇保存。
      4、在使用過程中如果流動相有磷酸緩沖鹽的存在,新柱在使用之前需用10%的甲醇水溶液以0.5~1.0的流速沖洗60min左右,將新柱高濃度甲醇溶液置換掉,進流動相,待系統基線平穩直接進樣即可。做完實驗再用10%的甲醇(色譜純)水溶液以0.5~1.0的流速沖洗60min左右,將色譜柱中緩沖鹽溶液置換掉,最后用100%的純甲醇清洗30min,最后用純甲醇保存色譜柱。

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