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    有了這些資料,安裝色譜柱將變得簡單

      色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質的鍵合相、氧化鋁、有機聚合物微球、多孔碳等,其粒度一般為3、5、7、10μm等,柱效理論值可達5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數的柱效;對于同系物分析,只要500即可;對于較難分離物質對則可采用高達2萬的柱子,因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復雜混合物分析的需要。
     
      色譜柱的作用機理:
      可以被認為是反相液相色譜通過采用極性固定相來運行的。采用的流動相是含有少量水/緩沖鹽或其他極性溶劑的高比例有機相。流動相中的水形成一個富水層被吸附在固定相表面,極性物質首先進入富水層得到保留。極性化合物是通過一個復雜的混合模式被保留的,包括:富水層和流動相之間的親水分配、極性官能團和固定相間的氫鍵作用以及離子官能團的靜電作用。當然,親水分配是主要的保留模式。從保留機理來看,HILIC和反相色譜柱是有著非常大的差別的。
     
      安裝:
      1、首先應確認柱和儀器的接頭以及管路是否匹配。為減少死體積,進樣閥、柱子、檢測器之間的連接管路內徑盡可能使用內徑較小的管線,同時控制進樣器、色譜柱和檢測器之間連接管線的長度。安裝色譜柱之前,確認流路系統中的溶劑是否正常。對分析較復雜的樣品建議安裝保護柱。
      2、為了使色譜柱與儀器系統達最佳的連接效果,應盡量使用與色譜柱接口相匹配的螺帽和錐形接頭,如原來的接頭長期匹配其他類型的色譜柱,建議在連接新色譜柱前應檢查匹配情況,避免造成色譜柱的損壞或因色譜柱不匹配造成的漏液。
      3、使用PEEK材料的通用接頭,只需用手擰緊不需要特定扳手,使用壓力為5000psi;使用溫度不得超過100℃。

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